Иммуноферментный анализ крови: что показывает, расшифровка результатов, нормы и отклонения

Иммуноферментный анализ

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, и приводимая ниже информация носит исключительно справочный характер.

Иммуноферментный анализ: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов.

Иммуноферментный анализ (ИФА, англ. Enzyme immunoassay, EIA) –лабораторный метод определения различных соединений (макромолекул, вирусов и пр.), в основе которого лежит реакция антиген-антитело.

Генетически чужеродные вещества, попадая в организм человека, вызывают специфические процессы, направленные на удаление этих веществ. Система организма, выполняющая данную функцию, называется иммунной системой, а сами процессы – иммунологическими.

Иммунная система представляет собой совокупность лимфоидных органов, которые функционируют согласованно за счет миграции лимфоцитов из крови в ткани и из ткани в кровь, медиаторов (посредников) и других факторов.

Лимфоциты.jpg

В- и Т-лимфоциты

Иммунная система слагается из центральных и периферических органов. К центральным относят тимус и костный мозг. В них лимфоциты дифференцируются (созревают) до стадии функционально активной клетки. К периферическим органам иммунной системы принадлежат лимфатические узлы, селезенка, лимфоидные структуры пищеварительного тракта, аппендикс, миндалины. В этих органах лимфоциты контактируют с антигеном, взаимодействуют между собой и с другими элементами иммунной системы.

Практически все периферические органы иммунной системы являются фильтрами или барьерами для распознавания, захвата и расщепления антигена.

Иммунная система.jpg

Антиген (англ. antigen от antibody-generator — «производитель антител») – любое вещество, несущее признаки генетически чужеродной информации, которое организм рассматривает как чужеродное или потенциально опасное и против которого начинает вырабатывать антитела (иммунный ответ).

Способность антигенов вызывать иммунный ответ называется иммуногенностью, а способность образовывать комплексы с антителами – антигенностью.

К антигенам относятся белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты, в том числе и в составе компонентов различных биологических структур (клеток, тканей, вирусов и т.д.).

Антитела (англ. antibody) – это специальные белки иммуноглобулины (Ig), которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого чужеродного агента в организм для борьбы с ним.

Антитела обладают способностью образовывать прочные комплексы с антигенами для последующего удаления их из организма.

Иммуноглобулины (Ig) по своей химической структуре относятся к гликопротеидам (белкам, содержащим в своей структуре олигосахариды). По своим свойствам и структурным особенностям иммуноглобулины подразделяются на пять основных классов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.

Виды антител.jpg

В организме антитела вырабатываются клетками крови – В-лимфоцитами. На своей поверхности эти клетки имеют рецепторы, с помощью которых они могут узнавать чужеродный антиген.

Антиген, встречаясь в кровотоке с соответствующим ему рецептором В-лимфоцита, активирует его. В-лимфоцит многократно делится и образует клон плазматических клеток. Каждый клон клеток секретирует однородные по своей структуре антитела.

Бактерия.jpg

Показания к проведению иммунологического обследования:

Острые и хронические бактериальные, вирусные и паразитарные инфекции (болезнь Боткина, сепсис, пневмония, лейшманиоз, туберкулез, лепра и др.), подозрение на СПИД.

Аутоиммунные заболевания (ревматическая болезнь, ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.).

Аллергические заболевания (бронхиальная астма, поллиноз и др.).

Злокачественные заболевания (лейкозы, лимфогрануломатоз и др.).

Кожно-венерические заболевания (контактный дерматит, пузырчатка, микоз, сифилис и др.).

Контроль цитостатической, иммунодепрессивной и иммуностимулирующей терапии.

Обследование пациентов до и после трансплантации.

Первичные иммунодефицитные состояния и др.

Постановка иммунологического диагноза складывается из следующих этапов:

Сбор иммунологического анамнеза.
Выявление клинических проявлений иммунопатологии.
Иммунологические методы исследования.

В иммуноферментном анализе применяют ферменты, которые могут связывать антитела или антигены, меняют окраску специального хромогенного субстрата при взаимодействии с ним и могут быть зарегистрированы физико-химическим методом (методом спектрофотометрии, флуориметрическим, люминисцентным и др.).

На настоящий момент имеются усилительные системы, позволяющие регистрировать наличие всего нескольких сотен молекул ферментов в 1 мл раствора.

Фермент – это сложное органическое вещество, вырабатываемое живой клеткой, способствующее различным химическим реакциям, происходящим в организме.

Хромогенный субстрат – это вещество белковой природы, приобретающее определенную окраску после расщепления специфическим протеолитическим ферментом.

Фотометрический анализ – метод качественного и количественного анализа, основанный на избирательном поглощении инфракрасного, видимого или ультрафиолетового излучения молекулами определяемого компонента или его соединения с соответствующим реагентом.

При проведении иммуноферментного анализа в качестве твердой фазы используется поверхность лунок полистиролового планшета, на которую адсорбированы входящие в состав тест-системы известные антитела (против определяемого антигена).

В лунку вносят исследуемую сыворотку крови. При наличии искомого антигена он соединяется с антителом, и образуются комплексы. Лунки промывают и удаляют не связавшиеся компоненты. В лунки вносят антитела к искомому антигену, меченые ферментом. Меченые антитела присоединяются к предыдущему комплексу и также остаются на стенках. Затем в лунки добавляют специфичный для фермента субстрат (перекись водорода) и хромоген (ортофенилендиамин). Если в исследуемой жидкости был антиген, фермент взаимодействует с перекисью водорода и разлагает его. Выделившийся при этом кислород окрашивает хромоген в желтый цвет. По интенсивности окрашивания, возникающего в результате реакции фермента и субстрата, можно судить о количестве антигенов.

По аналогичной схеме работают тест-системы для определения антител, но в качестве иммуносорбента в них используются антиген, а раствор, который добавляют, содержит раствор антигенов, меченых ферментом.

В клинической диагностике с помощью фиксированных на твердой фазе антител (антигенов), определяют присутствие антигенов микроорганизмов, антител к ДНК, иммунных комплексов, антигенов раковых клеток, антител к различным видам бактерий, вирусов, простейших.

Метод ИФА может применяться для диагностики:

Вирусных заболеваний:

ВИЧ-инфекции;
вирусных гепатитов;
цитомегаловирусной инфекции;
вируса Эпштейн-Барр;
герпетической инфекции;
коронавирусной болезни.

Для диагностики инфекций, передающихся половым путем:

сифилиса;
хламидиоза;
трихомониаза;
гонореи;
уреаплазмоза.

Уровня гормонов в эндокринологии.
Аутоантител и маркеров онкологических заболеваний в онкологии.
Общего IgE и специфических IgE антител в аллергологии.
Лекарственных препаратов, наркотиков в биологических образцах.
Белков сыворотки крови (ферритина, фибронектина и др.).

Подготовка к процедуре

Взятие пробы для лабораторного исследования методом ИФА должно проводиться:

желательно с 7 до 9 часов утра;
натощак, т.е. через 8-12 часов после последнего приема пищи;
после воздержания от алкоголя не менее 24 часов;
до проведения диагностических и лечебных процедур;
в ряде случаев следует учитывать фазу менструального цикла, фармакодинамику лекарственных препаратов, циркадные ритмы.

Пациент должен находиться в спокойном состоянии не менее 15 минут: сидя или лежа. Наложение жгута (манжеты) не должно превышать 1 мин.

Преимущества иммуноферментного анализа по сравнению с другими методами определения антигенов и антител:

высокая чувствительность (ИФА может обнаруживать одиночные молекулы анализируемого вещества);
возможность использования минимальных объемов исследуемого материала;
стабильность всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА при хранении;
простота проведения реакции;
возможность автоматизации всех этапов реакции;
относительно низкая стоимость диагностических наборов.

при наличии ревматоидного фактора в крови, который является антителом против собственных IgG;
при различных системных заболеваниях;
при нарушениях обменных процессов в организме;
при приеме некоторых лекарственных препаратов;
у новорожденных детей.

Л. К. Решетникова. Иммунология. – Благовещенск, 2019. – 176 с.
Гусякова О.А. Иммуноферментный анализ: учебное пособие для студентов лечебного, педиатрического, медико-профилактического факультетов, Самара: типография Клиник ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2010. – 32 с.

ВАЖНО!

Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики [1] , основанный на реакции «антиген — антитело», который позволяет выявлять вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей). Современная диагностика немыслима без таких высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня может быть достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ, — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген — антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения [2] , которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом [3] . Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины) [4] , способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген — антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Антиген «нападает» на организм.jpg

Какие антитела бывают?

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса M (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать в организме в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Также существуют иммуноглобулины класса A, или IgA (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), иммуноглобулины класса E, то есть IgE (борются с паразитарными инфекциями), и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, было ли у человека когда-либо то или иное заболевание (например, краснуха или ветряная оспа).

Зачем нужен иммуноферментный анализ?

Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ. Исследование помогает узнать, какие антигены или антитела присутствуют в организме человека.

Реакцию «антиген — антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела — в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит или не происходит образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать вывод о результатах анализа.

Виды-иммуноферментного-анализа.jpg

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Это интересно

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА [5] .

Какие преимущества у метода ИФА?

Высокая чувствительность [6] .
То есть возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока.
Высокая специфичность.
Подразумевается безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не какие-то другие.
Возможность определить заболевание на ранней стадии.
ИФА во многом заменил золотой стандарт микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни [7] .
Низкая вероятность ошибки.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не самый дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний [8,9] :
- IgM и IgG к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
- IgG к ВИЧ;
- IgM и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- IgM и IgG к вирусу Эпштейна — Барр;
- IgM и IgG к герпетическим инфекциям;
- IgM и IgG к токсоплазмозу;
- IgM и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- IgM и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Оценка наличия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
Выявление онкологических маркеров (простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других) [10] .
Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Анализируемый биоматериал и особенности его взятия

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и так далее.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

Сроки готовности результатов ИФА

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа может быть готов в течение одних–двух суток после взятия крови. В некоторых случаях — при необходимости получения экстренного ответа — этот срок может быть сокращен до двух–трех часов.

Расшифровка иммуноферментного анализа

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Анализируемые показатели

IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о реинфекции, хронической или скрыто протекающей инфекции.
IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, позволяет назначить адекватную терапию, что обеспечивает эффективное лечение заболевания.

Где можно сдать биоматериал на иммуноферментный анализ?

В поликлиниках и стационарах, работающих в рамках общественной системы здравоохранения, а также в частных диагностических центрах можно провести исследование иммуноферментным методом. Однако не стоит обращаться в первую попавшуюся лабораторию. Провести ИФА по всем правилам и без ошибок могут медицинские центры, которые работают в соответствии с международными стандартами качества.

Например, Лаборатория «Гемотест» предлагает пациентам широкий спектр иммуноферментных анализов на выявление самых разных заболеваний. Здесь проводятся:

исследование уровня общего иммуноглобулина E;
исследование уровня иммуноглобулина M;
исследование уровня иммуноглобулина G;
определение антител к бледной трепонеме иммуноферментным методом в крови;
определение антител классов М и G к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов в крови;

Для удобства пациентов сдавать биоматериал можно на дому. Для этого следует оставить заявку на выезд специалиста «Гемотест»: сделать это можно по телефону или на сайте. Срок выполнения исследований обычно зависит от сложности и может варьироваться от одного дня до двух недель.

Лаборатория «Гемотест» проводит свыше 2500 исследований: микробиологические, гистологические, общеклинические, молекулярно-генетические. Кроме того, компания предлагает готовые комплексы исследований для диагностики различных заболеваний, оценки состояния отдельных органов или целых систем организма.

Все исследования проводятся на собственной технологической базе, состоящей из пяти профильных лабораторий, оснащенных современными тест-системами и анализаторами ведущих мировых производителей BD, Siemens, Roche, Abbott.

P. S. «Гемотест» насчитывает более 1250 лабораторных отделений во всех федеральных округах России. Результаты исследований, проводимых здесь, признаются всеми медицинскими учреждениями.

* Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-50-01-011414 выдана 1 ноября 2019 года Министерством здравоохранения Московской области.

** Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-23-01-014424 выдана 13 марта 2020 года Министерством здравоохранения Краснодарского края.

1 https://ru.wikipedia.org/wiki/Иммуноферментный_анализ
2 https://archive.org/details/isbn_5060006441/page/n9/mode/2up
3 https://ru.wikipedia.org/wiki/Антиген
4 https://ru.wikipedia.org/wiki/Антитела
5 https://unimed.ru/biblioteka/pcr/istoriya-otkrytiya-sovremennyh-metodov-molekulyarnoj-diagnostiki.html
6 https://diaproph.com.ua/pdf/metodichky/rus/1_rus_imunoferment_analiz.pdf
7 Арутюнов А. О. Иммуноферментный анализ: диагностика в условиях «cito!» [Электронный ресурс] // Бюллетень медицинских интернет-конференций. — 2015. — URL: https://cyberleninka.ru/article/n/immunofermentnyy-analiz-diagnostika-v-usloviyah-cito (дата обращения: 15.06.2021).
8 Набиева Ф. С., Душанова Г. А., Бобокулов О. О. Значение иммуноферментного анализа в диагностике инфекционных заболеваний [Электронный ресурс] // Вестник науки и образования. — 2021. — URL: https://cyberleninka.ru/article/n/znachenie-immunofermentnogo-analiza-v-diagnostike-infektsionnyh-zabolevaniy (дата обращения: 15.06.2021).
9 Анцилевич Л. М., Ягудина Л. А. Практическое применение иммуноферментного анализа в диагностике заболеваний [Электронный ресурс] // Практическая медицина. — 2014. — URL: https://cyberleninka.ru/article/n/prakticheskoe-primenenie-immunofermentnogo-analiza-v-diagnostike-zabolevaniy (дата обращения: 15.06.2021).
10 Матвеева Л. В. Особенности изменений онкомаркеров при раке желудка [Электронный ресурс] // Медицинский альманах. — 2012. — URL: https://cyberleninka.ru/article/n/osobennosti-izmeneniy-onkomarkerov-pri-rake-zheludka (дата обращения: 15.06.2021).

Вся информация, касающаяся здоровья и медицины, представлена исключительно в ознакомительных целях и не является поводом для самодиагностики или самолечения.

Коронавирусная инфекция:
есть или нет?

ТЕСТИРОВАНИЕ ПО МЕТОДУ ИФА ДАЕТ МАКСИМАЛЬНО ТОЧНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ И ПОКАЗЫВАЕТ КОЛИЧЕСТВО ИММУНОГЛОБУЛИНОВ (АНТИТЕЛ) К КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

Тест позволяет выявить стадию заболевания и пациентов с бессимптомным течением болезни

Самые ранние антитела,
которые появляются при первой
иммунной реакции организма
на внедрение вируса
и указывают на то,
что заболевание протекает
на данный момент

Вырабатываются позже и
остаются надолго. Это
говорит о формирующемся
иммунитете

ЕСЛИ У ВАС ЕСТЬ ПРИКРЕПЛЕНИЕ К ЛЮБОЙ ГОРОДСКОЙ ПОЛИКЛИНИКЕ, ЗАПИСАТЬСЯ НА ПРОЦЕДУРУ МОЖНО НА ПОРТАЛЕ MOS.RU

для записи следует обратиться лично в одну из поликлиник округа вашего проживания на стойку информации, администратор поликлиники вас запишет при наличии свободных мест.

НЕОБХОДИМО ОБРАТИТЬСЯ В СПРАВОЧНУЮ СЛУЖБУ 122, там вам подскажут адреса поликлиник, в которых проходит взятие анализа.

Подробно узнать о правилах проведения тестирования и
записаться можно, перейдя по ссылке:

IGM: < 1

IGG: < 10

У ВАС НЕТ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ, ЧТО ГОВОРИТ О ТОМ, ЧТО ВАМ НАДО СОБЛЮДАТЬ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ВОЗМОЖНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ. В СЛУЧАЕ, ЕСЛИ НА ВАС НАЛОЖЕН КАРАНТИН ПОСТАНОВЛЕНИЕМ РОСПОТРЕБНАДЗОРА ИЛИ ИНФОРМИРОВАННЫМ СОГЛАСИЕМ, ВЫ ОБЯЗАНЫ СОБЛЮДАТЬ РЕЖИМ САМОИЗОЛЯЦИИ В ТЕЧЕНИЕ СРОКА, УКАЗАННОГО В ДАННЫХ ДОКУМЕНТАХ.

IGM: от 1 до 2

IGG: < 10

У ВАС СОМНИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ. У ВАС НЕТ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ, НО НАЛИЧИЕ IGM ОТ 1 ДО 2 ГОВОРИТ О ТОМ, ЧТО ВИРУС МОЖЕТ НАХОДИТЬСЯ В ВАШЕМ ОРГАНИЗМЕ И ВЫ МОЖЕТЕ ПЕРЕНОСИТЬ ИНФЕКЦИЮ В СКРЫТОЙ (БЕССИМПТОМНОЙ) ФОРМЕ. ДАННОЕ ЗАБОЛЕВАНИЕ ЕЩЕ ДО КОНЦА НЕ ИЗУЧЕНО, ПОЭТОМУ В КАЧЕСТВЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ МЕРЫ ПРОСИМ ВАС СОКРАТИТЬ КОНТАКТЫ С БЛИЗКИМИ ЛЮДЬМИ В ТЕЧЕНИЕ 7 ДНЕЙ. ЧЕРЕЗ НЕДЕЛЮ ПОВТОРНО СДАЙТЕ КРОВЬ ИЗ ВЕНЫ.

IGM: ≥ 2

IGG: < 10

ВЫ НАХОДИТЕСЬ В СТАДИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ. ДАЖЕ ЕСЛИ ВЫ НЕ ЧУВСТВУЕТЕ НЕДОМОГАНИЯ, ВЫ ЯВЛЯЕТЕСЬ НОСИТЕЛЕМ ВИРУСА. ЭТО ОПАСНО ДЛЯ ВАС И ОКРУЖАЮЩИХ ВАС ЛЮДЕЙ. ПОЖАЛУЙСТА, НАХОДИТЕСЬ В РЕЖИМЕ САМОИЗОЛЯЦИИ В ТЕЧЕНИЕ 14 ДНЕЙ, НЕ КОНТАКТИРУЙТЕ СО СВОИМИ БЛИЗКИМИ ВО ИЗБЕЖАНИЕ ИХ ЗАРАЖЕНИЯ. ЕСЛИ ВЫ ПОЧУВСТВУЕТЕ СЕБЯ ПЛОХО, НЕЗАМЕДЛИТЕЛЬНО ВЫЗОВИТЕ ВРАЧА НА ДОМ.

IGM: ≥ 2

IGG: ≥ 10

У ВАС ИМЕЮТСЯ АНТИТЕЛА К ВИРУСУ. ПРИ ЭТОМ НАЛИЧИЕ IGM ГОВОРИТ О ТОМ, ЧТО ВИРУС ВСЕ ЕЩЕ МОЖЕТ НАХОДИТЬСЯ В ВАШЕМ ОРГАНИЗМЕ И ВЫ МОЖЕТЕ ПЕРЕНОСИТЬ ИНФЕКЦИЮ В СКРЫТОЙ (БЕССИМПТОМНОЙ) ФОРМЕ. ДАННОЕ ЗАБОЛЕВАНИЕ ЕЩЕ ДО КОНЦА НЕ ИЗУЧЕНО, ПОЭТОМУ В КАЧЕСТВЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ МЕРЫ ПРОСИМ ВАС СОКРАТИТЬ КОНТАКТЫ С БЛИЗКИМИ ЛЮДЬМИ В ТЕЧЕНИЕ 7 ДНЕЙ. ЧЕРЕЗ НЕДЕЛЮ ПОВТОРНО СДАЙТЕ КРОВЬ ИЗ ВЕНЫ.

IGM: < 2

IGG: ≥ 10

У ВАС ИМЕЮТСЯ АНТИТЕЛА К ВИРУСУ, ЧТО ГОВОРИТ О ТОМ, ЧТО ВЫ БЫЛИ ИНФИЦИРОВАНЫ И ВОЗМОЖНО ВЫ ПЕРЕНЕСЛИ ИНФЕКЦИЮ В СКРЫТОЙ (БЕССИМПТОМНОЙ) ФОРМЕ. НЕЗАВИСИМО ОТ ЭТОГО ПРОСИМ ВАС СОБЛЮДАТЬ ОБЩИЕ ПРАВИЛА БЕЗОПАСНОСТИ, НАДЕВАТЬ МАСКУ И ПЕРЧАТКИ, НАХОДЯСЬ В ОБЩЕСТВЕННЫХ МЕСТАХ.

При столкновении с вирусом в организм человека попадают его частицы – инородные белки, один из них – белок N. В ответ организм начинает вырабатывать антитела к нему. Так формируется естественный иммунитет к вирусу.

Вакцина «Спутник–V» разработана на основе S-белка. Это маленькая неживая частица ДНК-вируса, не опасная для человека. Но организм распознает ее как коронавирус и начинает вырабатывать соответствующую защиту – так формируется иммунитет после прививки. Антитела в этом случае вырабатываются определенного типа: именно к S-белку.

Тест-системы, которые используются в городских ИФА-центрах, распознают антитела к N-белку, то есть показывают, сталкивался ли человек непосредственно с вирусом. Именно поэтому тест, сделанный в городском ИФА-центре, не сможет показать, сформировался ли иммунитет после вакцинации, но покажет иммунитет после заболевания, не важно переболел человек с симптомами или без.

Узнать, болели ли вы бессимптомно. Так как многие люди болеют бессимптомно, для них единственный способ узнать, болели ли они коронавирусом и выработал ли организм иммунитет – это сдать ИФА-тест в городской поликлинике.

Узнать свой уровень антител после болезни. Тем, кто явно переболел коронавирусом, тестирование на ИФА в городской поликлинике поможет узнать, какой уровень антител выработался после болезни. Это поможет принять решение о вакцинации – в случае если антител мало. Или о том, чтобы стать донором, если антител много.

ЕСЛИ ВЫ ПОЧУВСТВУЕТЕ СЕБЯ ПЛОХО —
НЕЗАМЕДЛИТЕЛЬНО ВЫЗЫВАЙТЕ ВРАЧА НА ДОМ

СВЯЗЫВАЕТСЯ СПЕЦИАЛИСТ И СООБЩАЕТ ЕМУ О РЕЗУЛЬТАТАХ, НЕОБХОДИМОСТИ САМОИЗОЛЯЦИИ И СКОРОМ ПОСЕЩЕНИИ ВРАЧА. ЗВОНОК ПРОИСХОДИТ С НОМЕРА 8(499) 940-18-30 c 9:00 до 23:00.

ДАЖЕ ПРИ ОТСУТСТВИИ СИМПТОМОВ, ХАРАКТЕРНЫХ ДЛЯ COVID-19, ВРАЧ ИЗ ПОЛИКЛИНИКИ ПО МЕСТУ ВАШЕГО ФАКТИЧЕСКОГО ПРЕБЫВАНИЯ (ЛИБО ЖИТЕЛЬСТВА) ПОСЕТИТ ВАС ДОМА В БЛИЖАЙШИЕ ДНИ:

ПРОИЗВЕДЕТ НЕОБХОДИМЫЕ РЕГИСТРАЦИОННЫЕ ДЕЙСТВИЯ И ДАСТ НА ПОДПИСЬ «ИНФОРМИРОВАННОЕ ДОБРОВОЛЬНОЕ СОГЛАСИЕ НА ЛЕЧЕНИЕ НА ДОМУ»

ЕСЛИ ДО ЭТОГО МОМЕНТА ВАМ НЕ ПРОИЗВОДИЛОСЬ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЕ (МАЗОК ИЗ ЗЕВА И НОСА), ТО ПРИ ПЕРВИЧНОМ ПОСЕЩЕНИИ ВРАЧ ПРОИЗВЕДЕТ ЗАБОР БИОМАТЕРИАЛА (ВОЗЬМЕТ МАЗОК)

В ТЕЧЕНИЕ 14 ДНЕЙ (ПЕРИОДА СОБЛЮДЕНИЯ РЕЖИМА ИЗОЛЯЦИИ НА ДОМУ) СОТРУДНИКАМИ ГОРЯЧЕЙ ЛИНИИ БУДЕТ ОСУЩЕСТВЛЯТЬСЯ АУДИОКОНТРОЛЬ НА ПРЕДМЕТ НАЛИЧИЯ ИЛИ ОТСУТСТВИЯ У ВАС СИМПТОМОВ ЗАБОЛЕВАНИЯ

В СЛУЧАЕ ЕСЛИ У ВАС ПОЯВЯТСЯ СИМПТОМЫ ЗАБОЛЕВАНИЯ, К ВАМ НАПРАВЯТ ВРАЧА ИЗ ПОЛИКЛИНИКИ. ВРАЧ НАЗНАЧИТ ИЛИ ИЗМЕНИТ СХЕМУ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ТЕРАПИИ.

Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA) – суть, принцип метода и этапы исследования. Анализ на антитела, классы антител, иммунный комплекс

Сайт предоставляет справочную информацию. Адекватная диагностика и лечение болезни возможны под наблюдением добросовестного врача. У любых препаратов есть противопоказания. Необходима консультация специалиста, а также подробное изучение инструкции!

В связи с развитием клеточных технологий, молекулярной биологии, генетики, физики, химии и ряда других высокотехнологичных дисциплин в повседневную практику внедряются новые высокоточные и высокотехнологичные методы. Данные междисциплинарные тенденции затрагивают и область медицинских знаний, и смежные области биологических, биохимических проблем. За последние десять лет получил широкое распространение и внедрение в массовую практику метод клинической лабораторной диагностики под названием иммуноферментный анализ.

Вообще технологии иммунологических ферментативных и радиологических реакций широко использовались в типировании клеток, культур клеток, различных тканей с начала 80-х годов XX столетия. Однако методы эти были очень трудоемкими, не унифицированными, не стандартизированными, что исключало их использование в лечебно-диагностических целях в массовом порядке. Такими методами пользовались лишь узкие, наукоемкие и высокоспециализированные лаборатории.

Однако с развитием техники, микротехники, производства различных биополимерных материалов стало возможным производить готовые наборы иммуноферментной диагностики, которыми смогут пользоваться лаборатории лечебно-профилактических учреждений широкого профиля. ИФА широко используется для диагностики всевозможных инфекций (хламидиоз, сифилис, цитомегаловирус, токсоплазмоз, герпес и т.д.), как острых, так и хронических, а также скрытых форм, которые протекают без клинических симптомов.Также этот метод применяют для контроля над хроническими заболеваниями. Давайте постараемся разобраться, что это за метод, и какие принципы лежат в его основе?

Компоненты иммуноферментного анализа – иммунная реакция и ферментативная реакция

Иммуноферментный анализ, как видно из названия, состоит из двух разных компонентов – иммунной реакции и ферментативной реакции. Иммунная реакция производит связывание биологических молекул, элементов клетки или микроорганизма, которые собственно и пытаются обнаружить, а ферментная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции. То есть иммунная реакция – это часть комплексной методики, которая собственно обнаруживает искомый микроб. А ферментная реакция – это та часть комплексной методики, которая позволяет перевести результат иммунной реакции в форму, видимую глазом, и доступную для измерения рутинными химическими методиками. Исходя из такой структуры метода иммуноферментного анализа, разберем обе его части по отдельности.

Иммунная реакция, что это? Что такое антитело, антиген?

Что такое иммунная реакция? Что такое антиген?
В первую очередь разберем, что такое иммунные реакции. Иммунные реакции – это специфические реакции связывания антигена с антителом с образованием иммунного комплекса. Что это значит? На поверхности каждой клетки любого организма имеются особые структуры, которые называются антигены. Антигены в целом – это молекулы, которые несут информацию о клетке (подобно информации на бейдже у человека, где указываются основные данные этого человека).

Индивидуальные и видовые антигены – что это? Зачем нужны эти антигены?

Имеются антигены индивидуальные, то есть присущие только данному конкретному организму. Эти индивидуальные антигены разные у всех людей, есть похожие друг на друга, но все равно отличающиеся. Двух одинаковых копий индивидуальных антигенов в природе не существует!

Второй основной тип антигенов – это видовые антигены, то есть присущие какому-либо конкретному виду живых существ. Например, у человека присутствует свой видовой антиген, общий для всех людей, у мышей имеется свой мышиный видовой антиген и т.д. На поверхности каждой клетки обязательно присутствуют видовой и индивидуальный антиген.

Видовой антиген используют клетки иммунной системы для опознавания «свой – чужой».

Как происходит узнавание антигена?

Иммунная клетка связывается с подозрительной клеткой и проводит опознание именно по индивидуальному антигену. В памяти иммунной клетки «записано» как выглядит «свой антиген». Таким образом, если антиген подозрительной клетки совпадает с описанием «свой антиген», значит, эта клетка собственного организма и опасности не представляет. Тогда иммунная клетка «отвязывается» и уходит. А если антиген не совпадает с описанием «свой», тогда иммунная клетка идентифицирует эту клетку как «чужой», а значит потенциально опасный для всего организма. В этом случае иммунная клетка не «отвязывается», а начинает уничтожать опасный объект. Точность такого иммунологического узнавания поражает воображение – 99,97%. Ошибок практически не бывает!

Что такое антитело, иммунный комплекс?
А что представляет собой антитело?

Антитело – это особая молекула, расположенная на поверхности иммунной клетки. Именно антитело и связывается с антигенами подозрительной клетки. Далее антитело передает информацию внутрь клетки, где происходит опознавание, и получает обратный сигнал двух видов «свой» или «чужой». При сигнале «свой» антитело разрушает связь с антигеном и отпускает клетку.

Что такое иммунный комплекс?
При сигнале «чужой» ситуация разворачивается иначе. Антитело не разрывает связь с антигеном, а наоборот, посылая специфические сигналы, вызывает «подкрепление». Биологически это означает, что другие антитела, находящиеся в другой части клетки, начинают перемещаться к участку, откуда идет сигнал опасности, и также образуют связь между собой и пойманным антигеном. В конце концов, антиген оказывается, окружен со всех сторон и прочно привязан.Такой комплекс антиген + антитело называется иммунный комплекс. С этого момента начинается утилизация антигена. Но сейчас подробности процесса нейтрализации антигена нас не интересуют.

Виды антител (IgA, IgM, IgG, IgD, IgE)
Антитела – это белковые структуры, которые, соответственно, имеют химическое название, которое и используется как синоним слова антитела. Итак, антитела = иммуноглобулины.

Существуют 5 типов иммуноглобулинов (Ig), которые связываются с разными видами антигенов в разных местах человеческого организма (например, на коже, на слизистых, в крови и т. д.). То есть антитела имеют разделение труда. Эти иммуноглобулины называются буквами латинского алфавита – A, M, G, D, E и обозначаются следующим образом – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE.

В диагностике используют только один вид антител, который наиболее специфичен в отношении определяемого микроба. То есть связывание данного вида антител с определяемым антигеном происходит всегда. Чаще всего применяются IgG и IgM.

Именно этот принцип иммунной реакции (уникальная точность и специфичность узнавания определяемого биологического объекта) лежит в основе иммуноферментного анализа.В силу высокой точности антител в узнавании антигенов, точность всего метода иммуноферментного анализа оказывается также высочайшей.

Ферментативная реакция

Какая реакция – ферментативная? Что такое сродство, субстрат и продукт реакции?

Перейдем к рассмотрению ферментативной реакции в работе метода иммуноферментного анализа.

Что такое ферментативная реакция?

Ферментативная реакция – это химическая реакция, при которой одно вещество под действием фермента превращается в другое. Вещество, на которое действует фермент,называется субстратом. А вещество, которое получается в результате воздействия фермента, называется продуктом реакции. Причем особенность ферментативной реакции такова, что определенный фермент действует только на определенный субстрат. Такое свойство фермента узнавать «свой» субстрат называется сродством.

Таким образом, каждый фермент проводит только одну, специфичную для него реакцию. Ферментов в биологическом мире известно великое множество, равно как и ферментативных реакций. В иммуноферментной диагностике используется лишь несколько ферментативных реакций – не более 10.При этом выбирали такие ферментативные реакции, продуктом которых являются окрашенные вещества. Почему же продукты ферментативной реакции должны быть окрашенными? Потому что для вычисления концентрации вещества по окрашенному раствору существует простой химический метод – колориметрия.

Метод колориметрии – суть и принцип

Колориметрия применяет измерение плотности окраски раствора, а по плотности окраски вычисляют концентрацию вещества.При этом специальный прибор – колориметр измеряет плотность окраски раствора. В колориметрии возможны два варианта зависимости плотности окраски от концентрации вещества – это прямо пропорциональная зависимость или обратно пропорциональная зависимость. При прямо пропорциональной зависимости, чем выше концентрация вещества, тем интенсивнее плотность окраски раствора. При обратно пропорциональной зависимости, чем выше концентрация вещества, тем ниже плотность окраски раствора. Технически это происходит так: берется несколько растворов с известной концентрацией вещества, измеряется плотность этих растворов, строится график зависимости концентрации от плотности окраски (калибровочный график).

Далее измеряют плотность окраски раствора, концентрацию которого выясняют, и по калибровочному графику находят значение концентрации, соответствующее уровню измеренной плотности окраски раствора.В современных автоматических колориметрах только один раз проводят калибровку, далее аппарат сам строит калибровочную кривую, которая остается в памяти прибора, и измерение происходит автоматически.

В иммуноферментном анализе чаще всего применяются следующие ферменты: пероксидаза, щелочная фосфатаза, авидин.

Как же совмещаются иммунологическая и ферментативная реакция в иммуноферментном анализе? Сейчас мы перейдем к рассмотрению собственно иммуноферментного анализа. Какие этапы он включает и что происходит при протекании этих реакций? Иммуноферментный анализ бывает прямой и непрямой.

Прямой иммуноферментный анализ – этапы проведения

В прямом иммуноферментном анализе используют антитела к выявляемому антигену, соединенные со специфической меткой. Эта специфическая метка и есть субстрат ферментативной реакции.

Прикрепление антигенов к поверхности лунки и соединение антигена с антителом

Как проходит прямой иммуноферментный анализ? Берется биологический материал (кровь, соскобы со слизистых, мазки) и помещается в специальные лунки. Биологический материал оставляют в лунках на 15-30 минут, чтобы антигены могли приклеиться к поверхности лунок. Далее в эти лунки добавляют антитела к выявляемому антигену. Это значит, что выявляя антигены, например, сифилиса, добавляются антитела против антигенов сифилиса. Эти антитела получают промышленным способом, а лаборатории покупают уже готовые наборы.Данную смесь исследуемого материала и антител оставляют на некоторое время (от 30 минут до 4-5 часов), чтобы антитела смогли найти и связаться со «своим» антигеном.Чем больше в биологической пробе антигенов, тем больше антител свяжется с ними.

Удаление «лишних» антител

Как было указано, антитела к тому же связаны со специфической меткой.Поскольку антитела добавляются в избытке, то не все они свяжутся с антигенами, а если антигена вообще нет в пробе, то, соответственно, ни одно антитело не свяжется с искомым антигеном. Для того чтобы убрать «лишние» антитела, содержимое из лунок просто выливают. В результате этого все «лишние» антитела убираются, а остаются те, которые связались с антигенами, поскольку антигены «приклеены» к поверхности лунок. Лунки несколько раз ополаскивают специальным раствором, который позволяет вымыть все «лишние» антитела.

Ферментативная реакция – образование окрашенного соединения

Далее начинается второй этап – ферментативная реакция. В промытые лунки добавляют раствор с ферментом и оставляют на 30-60 минут. Данный фермент имеет сродство к веществу (специфической метке), с которым связаны антитела. Фермент проводит реакцию, в результате которой эта специфическая метка (субстрат) превращается в окрашенное вещество (продукт). Затем методом колориметрии находят концентрацию этого окрашенного вещества. Поскольку данная специфическая метка связана с антителами, значит, концентрация окрашенного продукта реакции равна концентрации антител. А концентрация антител равна концентрации антигенов. Таким образом, в результате проведенного анализа мы получаем ответ, какова концентрация выявляемого микроба или гормона.

Именно так проходит прямой иммуноферментный анализ. Однако сегодня чаще используют непрямой иммуноферментный анализ, поскольку чувствительность и точность непрямого выше, чем прямого. Итак, перейдем к непрямому иммуноферментному анализу.

Непрямой иммуноферментный анализ – этапы проведения

В непрямом иммуноферментном анализе два этапа. При проведении первого этапа используют немеченые антитела к выявляемым антигенам, а во втором этапе применяют меченые антитела к первым немеченым антителам. То есть получается не прямое связывание антитела с антигеном, а двойной контроль: связывание антител с антигеном, после чего связывание вторых антител с комплексом антитело + антиген. Как правило, антитела для первого этапа – мышиные, а для второго – козьи.

Фиксация антигенов на поверхности лунки и связывание антигена с немеченым антителом
Так же как и для прямого иммуноферментного анализа производится забор биологического материала – кровь, соскобы, мазки. Исследуемый биологический материал вносят в лунки и оставляют на 15-30 минут для приклеивания антигенов к поверхности лунок. Затем в лунки вносят немеченые антитела к антигенам и оставляют на промежуток времени (1-5 часов), чтобы антитела связались со «своими» антигенами и образовали иммунный комплекс (первый этап). После чего удаляют «лишние», не связавшиеся антитела, путем выливания содержимого лунок. Производят промывку специальным раствором для полного удаления всех не связавшихся антител.

Связывание меченого антитела с комплексом антиген + немеченое антитело
После чего берут вторые антитела – меченые, добавляют в лунки и опять оставляют на некоторое время – 15-30 минут (второй этап). За это время меченые антитела связываются с первыми – не мечеными и образуют комплекс – антитело + антитело + антиген. Однако и меченые, и не меченые антитела вносятся в лунки в избытке. Поэтому нужно опять удалить «лишние», уже меченые антитела, которые не связались с немечеными антителами. Для этого повторяют процедуру выливания содержимого лунок и промывки специальным раствором.

Ферментативная реакция – образование окрашенного соединения
После чего вносят фермент, осуществляющий реакцию превращения «метки» в окрашенное вещество. Окраска развивается в течение 5-30 минут. Затем проводят колориметрию и вычисляют концентрацию окрашенного вещества. Поскольку концентрация окрашенного вещества равна концентрации меченых антител, а концентрация меченых равна концентрации немеченых антител, которая, в свою очередь равна концентрации антигена. Таким образом, получаем концентрацию выявляемого антигена.
Такой двойной контроль в виде использования двух видов антител позволил повысить чувствительность и специфичность метода иммуноферментного анализа. Несмотря на удлинение времени проведения анализа и включение дополнительных этапов, эти потери компенсируются точностью результата. Именно поэтому в настоящее время подавляющее большинство методик иммуноферментного анализа – это непрямой иммуноферментный анализ.

Какие заболевания выявляют методом иммуноферментной диагностики?

Перейдем к рассмотрению того, какие заболевания и какие биологически активные вещества выявляются методом иммуноферментного анализа. Вещества, выявляемые методом иммуноферментного анализа, представлены в таблице.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — что показывает, когда назначается ИФА крови

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод выявления в крови специфических антител, представляющих собой молекулы иммуноглобулинов. Он отличается высокой точностью и чувствительностью, позволяет определить не только качественный, но и количественный состав антигенов и антител в организме. В медицине иммуноферментный анализ применяется для выявления болезней, которые провоцируют микроорганизмы различных классов — от вирусов до паразитов, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний.

Особенности анализа ИФА

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов — иммунной и ферментативной реакции. Иммунная реакция связывает биологические молекулы, элементы клетки или микроорганизма, которые пытаются выявить. Ферментативная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции.

ИФА относится к непрямым методам диагностики, так как с ее помощью можно определить наличие антител к патогенному микроорганизму, а не самого возбудителя. Этот анализ рекомендуется выполнять совместно с ПЦР-диагностикой.

Важность иммуноферментного анализа несомненна: его применяют, если требуется определить стадию развития заболевания, провести мониторинг проведенного курса лечения, оценить ответ организма на лечение либо подобрать оптимальную схему терапии.

К преимуществам ИФА относят следующее:

высокая чувствительность (до 90%), позволяющая обнаружить микроорганизмы даже в том случае, если они присутствуют в минимальных концентрациях;
возможность выявить заболевание еще до проявления симптомов;
скорость проведения анализа и получения результатов;
возможность определить примерный срок заражения, а также тип течения инфекции (острая или хроническая);
выявление с высокой степенью достоверности микроорганизмов, которые невозможно определить путем применения других диагностических методов (посева, микроскопии и т.д.).

Показания к проведению иммуноферментного анализа крови

Методика ИФА позволяет выявить в крови любой антиген — не только собственный, но и чужеродный для организма. Ее назначают при подозрении на скрытую инфекцию. Показаниями для проведения этого анализа являются:

выявление различных инфекций (гепатиты, паразитарные инфекции, герпес, хламидии, токсоплазмоз, сальмонеллез, вирус Эпштейн-Барра);
определение содержания гормонов для оценки работы органов эндокринной системы — щитовидной железы, гипофиза, половых желез;
выявление и отслеживание онкомаркеров (ПСА у мужчин, фактор некроза опухоли и т.д.);
диагностика аутоиммунных заболеваний (системный васкулит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шегрена).

Также иммуноферментный анализ позволяет определить наличие антител к вирусу у пациента после прививки.

ИФА не оказывает непосредственного воздействия на антиген: этот метод позволяет оценить реакцию организма на присутствие такого антигена.

Чаще всего для проведения иммуноферментного исследования используют сыворотку венозной крови, взятой у пациента натощак. Также для анализа могут использоваться околоплодные воды, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела и слизь цервикального канала и уретры.

Подготовка к анализу ИФА

Чтобы снизить риск ошибки при проведении иммуноферментного анализа, пациенту рекомендуют подготовиться к этой процедуре. Речь идет о том, чтобы в течение 7-10 дней до назначенного исследования:

прекратить прием антибиотиков, а также противовирусных и антигистаминных препаратов;
исключить из рациона продукты-аллергены (шоколад, мед, орехи, яйца);
отказаться от жирных, острых, жареных блюд, алкоголя, сладостей;
ограничить физические нагрузки;
избегать сильных эмоциональных потрясений.

За сутки до забора крови нужно прекратить курение.

Интерпретация результатов анализа

При выполнении иммуноферментного анализа выявляют антитела разных типов – иммуноглобулины классов M, A, G (JgM, JgA, JgG). Они появляются в разные промежутки времени.

IgM указывает на то, что инфекция находится на острой стадии развития. Этот иммуноглобулин появляется в крови на 4-5 день после предполагаемого заражения. Если выявляют IgM, то пациент в данный момент является больным.

IgG характеризует хроническую форму инфекционного процесса, а также свидетельствует о наличии стойкого иммунитета к антигену. Выработка этого иммуноглобулина происходит на 20-28 день с момента заражения. IgG может сохраняться в крови долгое время – несколько месяцев и даже лет.

IgA – иммуноглобулины, выявление которых указывает на переход острой формы инфекционного процесса в хроническую. Они вырабатываются на 14-20 день с момента заражения и сохраняются в крови больного около двух месяцев.

Анализ ИФА может демонстрировать разные комбинации этих иммуноглобулинов. В зависимости от сочетания, они указывают на определенный этап в развитии заболевания:

JgM (-), JgG (-), JgA (-). Иммунитет к инфекции отсутствует.
JgM (-), JgG (+), JgA (-). У больного имеется иммунитет, приобретенный после введения вакцины или выполнения прививки.
JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+). У пациента присутствует острая инфекция.
JgM (+), JgG (+), JgA (+). У больного протекает период обострения хронической инфекции.
JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-). У пациента имеется хроническая инфекция.
JgM (-). Пациент был заражен, но сейчас выздоровел.

Если ИФА направлен на исследование гормонов щитовидной железы, то его допустимые границы находятся в таких пределах:

Тиреоглобулин – до 70 МЕ/мл.
Тироксин – 64-146 нмоль/л.
Трийодтиронин – 1,8-2,8 нмоль/л.
Свободный тироксин – 11-25 пмоль/л.
Свободный трийодтиронин – 4,49-9,3 пмоль/л.

При диагностике аутоиммунных заболеваний у пациента могут выявляться такие антитела:

Антинуклеарные (аутоантитела к антигенам ядра клеток). Они характерны для системных аутоиммунных заболеваний.
Антитела к растворимым нуклеарным антигенам. Такие компоненты проявляются при различных системных аутоиммунных процессах.
Антикардиолипиновые антитела IgG и IgM. Они характерны для антифосфолипидного синдрома.
Антитела к двухспиральной ДНК, которые являются специфичными для системной красной волчанки.
Ревматоидный фактор. Антитела такого типа выявляют при ревматоидном артрите, хотя они не специфичны конкретно для этого заболевания и могут обнаруживаться при других отклонениях, а также у абсолютно здоровых пациентов.

Сейчас ИФА-анализ широко используется для выявления антител к коронавирусной инфекции.

Анализ ИФА — иммуноферментный анализ

С помощью ИФА – иммуноферментного анализа – определяют не только наличие инфекции, но и примерное время заражения, а также обнаруживают обострения хронических инфекционных процессов. Методика позволяет выявить заболевания до возникновения симптомов.

Девушка сдает кровь

Показания к проведению ИФА-анализа

Возможное заражение гепатитами B, C, D (дельта) – пожелтение кожи и склер, потемнение мочи, светлый кал, кожный зуд, боль в правом подреберье.
Подозрение на инфицирование туберкулезом и ВИЧ – кашель, боли в костях, повышение температуры, ухудшение общего состояния, похудение, склонность к инфекциям, увеличение лимфоузлов, нарушение работы кишечника, появление крови в мокроте.
Признаки сифилиса – появление язвы (твердого шанкра) на любой части тела, увеличение лимфоузлов, различные высыпания на коже и слизистой. Исследование позволяет обнаружить не только свежие, но и запущенные случаи болезни.
Подозрение на заражение различными венерическими инфекциями. ИФА-анализ нужно сдать при возникновении боли во время мочеиспускания, выделений из уретры половых путей, различных высыпаний в интимной зоне, неприятного запаха мочи, появлении в урине мути и гноя. Методика выявляет антитела к различным возбудителям половых инфекций – хламидиям, микоплазмам, уреаплазмам.
Подозрение на кандидоз (молочницу), проявляющийся творожистым налетом в интимной зоне, во рту, в паховых складках, области заднего прохода, а также белыми выделениями из половых путей, напоминающими свернувшееся молоко. Иммуноферментный анализ крови позволяет выявить не только наличие возбудителя, но и его концентрацию.
Возможное заражение паразитами, проявляющееся нарушением работы кишечника, тошнотой, рвотой, анемией (малокровием), отеками, болями в мышцах, слабостью, головной болью. Метод выявляет паразитирование простейшими – лямблиями и гельминтами (глистами) – трематодами, трихинеллами, эхинококком. ИФА намного информативнее анализа кала, поскольку выявляет даже возбудителей, находящихся вне кишечника.
Подготовка к беременности. Перед ее планированием нужно обследоваться на TORCH-инфекции (токсоплазмоз, краснуху, цитомегаловирус), приводящие к аномалиям развития плода. Обоим родителям нужно также сдать кровь на гепатит и половые инфекции. Анализы на TORCH-инфекции сдают повторно на 12 неделе беременности.
Планируемое стационарное лечение, подготовка к оперативным вмешательствам, гинекологическим, хирургическим и урологическим процедурам. В этом случае ИФА-анализы сдаются непосредственно перед госпитализацией или операцией, поскольку срок их действия ограничивается одним-двумя месяцами.
Донорство – всех потенциальных доноров крови и её элементов, яйцеклеток, сперматозоидов, костного мозга обязательно обследуют на сифилис, гепатит и ВИЧ.
Прохождение различных медкомиссий, в которые, как правило, входят ИФА-анализы на сифилис, гепатиты, вирусы ВИЧ типа 1 и 2. Многие комиссии также включают исследования крови на туберкулез и ЗППП.

Анализ ИФА — иммуноферментный анализ

Подготовка к ИФА-анализу

Вечером перед сдачей крови нельзя употреблять жирную и тяжелую пищу, поскольку это может привести к ложноположительным результатам. Можно пить воду и несладкие напитки. Алкоголь запрещен. Кровь берется натощак, в течение получаса перед ее сдачей нельзя курить.

Отказ от курения

Что значит ИФА-анализ и как он проводится

Суть этого исследования – обнаружение в сыворотке крови и измерение концентрации антител (иммуноглобулинов, Ig). Эти соединения выделяются организмом в ответ на попадание антигенов – чужеродных белков, принадлежащих возбудителям инфекции.

При проведении анализа методом ИФА в сыворотку крови добавляют реактивы, содержащие «меченые» антигены. Эти компоненты «ищут» антитела – иммуноглобулины, выработанные организмом в ответ на имеющуюся инфекцию, и соединяются с ними. Такая реакция называется антиген-антитело.

То есть это исследование ищет не самих возбудителей, а вещества, образовавшиеся из-за их вторжения. Поскольку белки антигенов, входящие в состав реактивов, метят определённым образом, их соединения с иммуноглобулинами можно обнаружить лабораторным путем. При выявлении в образце сыворотки крови комплексов антиген-антитело ИФА-анализ считается положительным.

Лабораторные исследования

Применяемые реактивы «настроены» на конкретных возбудителей. Это дает возможность устранить ложноположительные тесты, указывающие на несуществующее заражение.

Исследования дают возможность выявить примерный период заражения, а также определить характер и тяжесть болезни. С помощью этого метода также определяют содержание каждого из иммуноглобулинов или их общую (суммарную) концентрацию, которая меняется в зависимости от периода и тяжести заболевания.

В разные периоды болезни выделяется несколько видов антител (иммуноглобулинов, Ig):

IgM – образуются в острую фазу болезни, т.е. примерно через 2 недели после инфицирования. Затем их уровень постепенно падает.
IgA – появляются в разгар инфекционного процесса. По мере выздоровления их содержание уменьшается. Если уровень IgA в ходе лечения не снижается, велика вероятность, что болезнь перешла в хроническую форму.
IgG – выявляются на этапе выздоровления. Они могут долго обнаруживаться в организме даже после полного излечения. В некоторых случаях такие иммуноглобулины остаются в организме пожизненно. В такой ситуации ИФА крови показывает не имеющуюся, а когда-то перенесенную инфекцию.

Обнаружение IgM и IgG указывает на обострение хронического инфекционного процесса, поэтому считается неблагоприятным признаком.

Преимущества ИФА-анализа

Выявление болезней до возникновения симптомов, а также инфекций, имеющих скрытую вялотекущую и атипичную форму.
Высокая чувствительность, выявляющая концентрацию антител до 0,05 нг/мл. Это позволяет обнаружить возбудителей, находящихся в организме в малых концентрациях.
Простота проведения реакции и её автоматизация, дающие возможность получить результаты в достаточно короткий срок.
С помощью ИФА-диагностики можно не только выявить инфекцию, но и определить примерный срок заражения, а также её тип течения (острая, хроническая).
ИФА-анализ с высокой достоверностью выявляет микроорганизмы, которые не диагностируются при помощи микроскопии, посевов и некоторых других методов.
Возможность проведения количественного анализа, показывающего концентрацию антител. По этому показателю можно судить о степени инфицированности и периоде болезни.

Сочетание двух методов обследований ИФА и ПЦР (обнаружение микроорганизмов по фрагментам их генного материала) дает возможность с практически 100% точностью определить все имеющиеся инфекции. Такое сочетание позволяет минимально сократить «период окна», во время которого возбудитель уже находится в организме, а ИФА-анализ отрицательный, поскольку еще не успели выработаться антитела.

Анализы на инфекции

ИФА-анализы на различные инфекции можно пройти в «Университетской клинике». Исследования проводятся с применением новых технологий и реактивов, что позволяет добиться их высочайшей точности.

При положительных результатах ИФА нужно обратиться к врачу, который проведет расшифровку анализов и назначит лечение. После окончания терапии нужно обследоваться повторно, чтобы убедиться, что болезнь полностью пролечена.